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什么是梯度PCR?

来源:www.cc3x.com   时间:2023-07-19 16:08   点击:68  编辑:admin   手机版

一、什么是梯度PCR?

对于一个PCR反应,虽然有各种各样的PCR仪引物设计软件或者经验公式计算最适的退火温度,可是由于模版中碱基的组合千变万化,对于特殊片断,经验公式得到的数据不一定能P出来结果,细微的变化对结果都可能产生决定性的影响,因而“摸条件”一度是让人很头疼的问题。梯度PCR的出现部分解决了一些问题——在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定范围内按照梯度变化,根据结果,一步就可以摸索出最适合的反应条件。不单退火温度,连变性温度和延伸温度都可以优化——对于多种聚合酶混合酶扩增如Invitrogen、Clontech、Promega的多数高保真Taq酶来说这个非常重要,因为Taq和校正酶的最佳反应温度可能有显著差异,优化延伸温度就显得很重要。多次实验可在一台仪器上完成,既节省实验时间提高效率,又节省实验成本。 检验地带网 对于带梯度功能的PCR仪,需要考虑梯度模式下不同梯度管排间的温度均匀性和准确性,还必须考虑仪器在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。这种差异可能导致在梯度模式下得出的最佳条件与标准模式下单独做的结果出现差异。SteadySlope技术是eppendorf拥有的梯度PCR技术专利,可以同样的温度变化速率到达所有设定的梯度温度,所以在梯度模式下具有恒定的温度性。这一技术保证了在梯度模式和普通模式之间可以进行可靠的信息传递,不会因为温度特性不同而导致产量和特异性的变化。MJ没有付专利费而选择在梯度模式下采用不同的降温速率,每个梯度温度之间的温度曲线不同,从梯度模式向普通模式进行转换的可能会出现问题。此外采用TCT(三组回路)技术的梯度PCR仪由于在梯度PCR模式下增加了一个加热和冷却的控制区域,保证了梯度温度控制的精确性并使不同梯度管排间的温度均匀性更好。 在PCR仪上增加原位PCR模块就可以在玻片上进行原位PCR扩增,MJ和eppendorf的PCR仪都有提供原位适配器以满足不同需要。购买配有支持原位PCR模块的PCR仪对从事医学研究的工作者是很值得的,一机两用。 此外,随着基因组高通量研究的需求的提高,各品牌都推出了多槽式高通量PCR仪,各有特长:MJ有一种一拖四,就是1个主机带4个扩增槽,每个槽可以独立控温,一次可以作96x4个样品的PCR,不过一旦出现问题4个都不能用了。ABI则在原来的9700的基础上推出了双384孔的基座,一次完成384x2个样品,使得9700的功能又扩展到高通量领域而无需购买新的机器,可惜两个384槽不能独立控温。

二、梯度吸音棉和普通隔音棉有什么区别

吸音棉消音作用说声能转化热能隔音材料确实阻断声音传播容易引起声能反射 吸音隔音材料比我目主要隔音说白要噪音消掉比梯度吸音棉种层压阶梯密度孔材料边孔连通性声音进与材料孔壁发摩擦能量转化终达衰减声能目 直接隔音棉贴玻璃墙选材料应该定效情况两种:种使用材料本身没效跟材质、结构都关系使用梯度吸音棉发现能产效;另外种情况 说隔音棉规安装式应该填充龙骨边用板封说安装才能效发挥化直接贴式用材料比梯度吸音棉能效隔音效跟龙骨安装式定差别选 用高阻隔声毡材料隔音效相显

三、什么是PN结势垒电容 什么是PN结扩散电容?

PN结电容分为两部分,势垒电容和扩散电容。

PN结交界处存在势垒区。结两端电压变化引起积累在此区域的电荷数量的改变,从而显现电容效应。

当所加的正向电压升高时,PN结变窄,空间电荷区变窄,结中空间电荷量减少,相当于电容放电。同理,当正向电压减小时,PN结变宽,空间电荷区变宽,结中空间电荷量增加,相当于电容充电。加反向电压升高时,一方面会使耗尽区变宽,也相当于对电容的充电。加反向电压减少时,就是P区的空穴、N区的电子向耗尽区流,使耗尽区变窄,相当于放电。

PN结电容算法与平板电容相似,只是宽度会随电压变化。

下面再看扩散电容。

PN结势垒电容主要研究的是多子,是由多子数量的变化引起电容的变化。而扩散电容研究的是少子。

在PN结反向偏置时,少子数量很少,电容效应很少,也就可以不考虑了。在正向偏置时,P区中的电子,N区中的空穴,会伴着远离势垒区,数量逐渐减少。即离结近处,少子数量多,离结远处,少子的数量少,有一定的浓度梯度。

正向电压增加时,N区将有更多的电子扩散到P区,也就是P区中的少子----电子浓度、浓度梯度增加。同理,正向电压增加时,N区中的少子---空穴的浓度、浓度梯度也要增加。相反,正向电压降低时,少子浓度就要减少。从而表现了电容的特性。

PN结反向偏置时电阻大,电容小,主要为势垒电容。正向偏置时,电容大,取决于扩散电容,电阻小。

频率越高,电容效应越显著。

在集成电路中,一般利用PN结的势垒电容,即让PN结反偏,只是改变电压的大小,而不改变极性。

四、跑步的技巧,你知道多少呢?

不拒绝――拉伸恢复很关键 

跑步中的肌肉拉伤主要由肌肉、韧带的过度牵引、抻拉超过极限值引起的。针对跑后的运动恢复、后续营养补充我总结出下列几种方法,供跑友参考。 

一、拉伸:压腿、坐式拉伸韧带、小腿拉伸、弓步拉伸、站立后搬腿拉伸、拉伸腿筋等方法,拉伸应该保持在半分钟以上,拉伸的要求是拉伸部位感觉到酸胀就可以了,一定不要拉疼,避免拉伸受伤。 

二、按摩:坐在床上把双腿放平、放松大腿,捏住大腿的肌肉进行抖动半分钟以上,用力揉压大腿肌肉,从下而上用力推摩,按摩几分钟即可,放松要保证时间,不能草草了事。跑马后,通过拉伸能够快速排掉身体堆积的乳酸,减少酸痛感。 

三、排酸跑:通过慢跑能够快速排掉肌肉里的乳酸。当然,排酸跑也要遵守循序渐进的原则。完成一届马拉松赛事后,第一天最好休息,第二天开始排酸跑。休息这一天主要是让身体自行修复损伤部位,如果赛后不给身体休息的时间,损伤会加重,恢复时间会延长。排酸跑的跑量要根据自己的身体状况来定,个人觉得普通以5公里左右为宜,第三天可以加到7公里,第四天上升到10公里。当然如果第一天跑完后感到不适,你也可以安排跑休,不必每天都跑。跑的前提就是不累、不伤。 

四、睡眠:充足的睡眠是身体恢复的良药。运动过后的肌肉疲劳及损伤只要给它充足时间,人体的自我修复功能就会产生效率。不要让自己的身体总是处于疲劳状态,那样对身体恢复非常不利。 

五、现代科技装备:SKINS 压缩衣,梯度压缩加快血液循环,增加供氧,提高运动肌群活力,促进新陈代谢,减少乳酸堆积,加快恢复。它对关键运动肌群的包裹和支撑作用,有助于见底肌肉震动和肌肉排列。SKINS A400系列,适合各项运动穿着,能够降低乳酸堆积,延长运动的时间和强度,不容易累。SKINS RY400恢复系列,增加疲劳部位如腿部、肩部等等部位的血液循环,起到加快身体恢复的效果通过与多位穿着压缩衣的选手交流,压缩衣的科技含量和性能得到了充分的肯定。 

六、运动保健食品:可以作为大运动量过后身体消耗的有效补充。当然这些也要因人而异。我个人也曾在跑马后食用过蛋白粉,螺旋藻,纽崔莱倍立健等,这些保健品对于体能快速恢复会起到辅助作用。及时的补充蛋白质会使身体更快的恢复,一个健康成人每日所需蛋白质的量按每公斤体重计算为0.8~1.0克,过量服用则会增加肾脏负担,并可能因此加速其老化和损害;螺旋藻可以调节人体的酸碱度,其叶绿素可以净化血液,清除体内毒素,所含的各种氨基酸、维生素、矿物质和微量元素能增强内脏器官功能。纽崔莱倍立健可作为普通膳食补充剂,其中含有紫花苜蓿、菠菜、胡萝卜、欧芹、针叶樱桃、西洋菜6种植物营养素。还包含钙、镁、锌、硒、等十多种矿物质。除天然的维生素、矿物质等营养素外,还含有许多具有生物活性、对人体健康有益的成分,植物营养素是人类新的健康宝库---如类胡萝卜素、类黄酮等,具有增强机体免疫力、增加骨密度等作用。 

不负责――该吃就吃,该补就补 

跑马前的能量储备。跑前很多人为了减体重,特意加大运动量,并且节食。我认为这样很不科学,必定我们不是专业运动员,没必要为了提高几分钟的成绩而牺牲健康。拿我来说,赛前我比平时吃的还要多,有人总觉得奇怪,说你吃得多还那么瘦?那是因为我平时的运动量足够大。当你月均跑量达到或超过400公里时,你可以像我一样瘦,而且再也不必节食,而是大吃特吃。一场马拉松下来,身体的消耗巨大,赛前如果没有很好的能量储备,你用什么去支撑全程?靠思想意志?那太不现实,也无法做到。赛前一天,我一般会大量进食碳水化合物,睡前还要喝自制的饮料,补充钾和钙。 

跑马中的能量补给。我至今参加了十二届马拉松,三届越野跑赛事,我也一直在尝试用不同的方法完成跑马中的补给,通过反复总结我得到一套适合自己的补给方法。能量胶、盐、电解质、水,这些在途中都要补,但补多少因人而异。我身材不高、体重轻、体脂小,消耗也少,以前跑马途中补给并不多,这得益于我平时训练养成的超强耐受力,但夏天跑马,消耗肯定更大,为此你必须做出改变。迄今为止,张北马拉松是我唯一一个每站必补的马拉松,一个饮水点都没有落下。自然,这一次我也是顺利地跑完全程,成绩也令人满意。及时的补充可以让你在比赛中避免出现体力透支、抽筋等突发状况,也会让你在赛后尽快恢复。 

跑马后的营养补充和放松拉伸同样重要。马拉松消耗巨大,跑后常出现饥饿、口渴甚至身体虚脱的状态。这时候千万不要硬撑,而要及时补充,你可以通过运动饮料来为自己补充身体流失的微量元素和电解质,通过泡腾片来补充维C,通过香蕉来补充钾和钙等,通过能量棒来补充糖分。这时候千万别想着减肥什么的,该吃就吃,该补就补,以便使自己的身体及时有效地恢复到正常状态。如果补充的时间太晚,往往起不到很好的恢复效果。 

不主动――不要盲目跟高手攀比 

为了使自己跑得更好,我们应该注意第一个问题,那就是平时的训练量。长跑是一个量的积累,是一个循序渐进的过程。每个人应该根据自己的不同体质、不同体能来制定适合自己的训练计划,不要盲目跟高手攀比。如单单为了健身,一次能跑45分钟以上的距离就可以了,而且你要采取最适合自己的速度,不必求快,能跑多远跑多远,不要强迫自己完成过多的跑量,以免受伤。当你坚持跑完一到两周后,如果能轻松适应之前的跑量,可以在接下来的一周适当增加1公里的距离,并保持速度不变。这样累计下来,也许半年以后,你会惊喜地发现10公里、20公里已经不在话下。切记循序渐进,不能操之过急,如果受伤,你恢复健康的时间远远要比你想象的还要漫长。 

当你可以轻松完成长距跑后,你可以考虑稍稍提高你的跑步强度。就是说你可以根据自己的身体承受能力,提高速度、缩短时间来增加强度。首要前提依然是跑得舒服、不受伤。这样也许你会发现,你可以在很舒服的状态下跑得更快更远!这是因为持之以恒的锻炼让你的心肺功能足够强大起来,你的身体已经可以适应如此大的运动强度了。合理的训练计划,一定能提高你的训练成绩,并且规避运动损伤。 

日常跑步消耗掉的水分、糖分、蛋白质、矿物质、维生素,会通过日常饮食得到有效补充,让你的身体很快便恢复到正常水平,这个你大可不必担心。但像马拉松这样的大剂量长跑运动,你就必须注意合理的营养补充了。补充得力,身体恢复快,补充不力,很可能出现问题。而能量的补充,应分为跑前、跑中、跑后三个阶段,而不可能集中一次完成。 

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